液基夹层杯法检测抗酸杆菌
2019-02-22 10:44:23 来源: 作者:王凤霞 【 】 浏览:1706

结核病的早期诊断和有效治疗是控制结核疫情的关键,而准确、快捷、简便的实验室检测方法对于结核病的早期诊断和及时治疗具有十分重要的意义。培养法虽然有较高的阳性率,但培养周期长,无法实现快速检测,不利于结核病的早发现早治疗;血清学试验检测结合抗体特异度不高;聚合酶链反应具很高的敏感性和特异性,但实验条件要求高,不利于基层医院开展。痰液中检测到结核杆菌一直被认为是诊断活动性肺结核的金标准。但传统涂片法阳性率较低,给一些肺结核患者的诊断和鉴别诊断带来一定困难,不得不依靠其他诊断标准进行诊治。

液基夹层杯离心集菌涂片法(夹层杯法)是一项基于液基薄层技术用来诊断结核病的新技术。由于其利用了液基标本处理、高效痰标本消化液化等技术,能有效缩短检测时间,提高检出率。

实验方法:

1.痰标本的留取:按照《痰涂片镜检质量保证手册》留取晨痰标本,嘱咐患者用力漱口,清晨深咳痰约3~5 mL置于密闭的无菌标本杯中送检。

2.夹层杯法:取痰液3~5 mL,加2倍体积的消化液,混匀。倒入夹层杯内振荡10 min。待完全液化后置于TQ-12型自动离心涂片机上,4500 r/min离心5 min,弃上清液、沥干;滴加抗酸染色液5~7滴。干片机内加温60左右染色5 min,冲洗,沥干;滴加B液4~6滴,脱色至无色,冲洗、沥干;滴加C液4~6滴,染色1~3 min,水洗,烘干。用取片针将基片从夹层杯底部顶起。再用镊子夹出基片,印干水分后烘干,用中性胶封片。撕去背面保护膜后油镜镜检。

夹层杯法所需设备简单,成本较低,且该法收集标本的条件、标本量、染色温度、夹层杯菌膜面积、每个油镜视野的面积均易被标准化,而便于开展室内质量控制和室问质量评价。同时,制作烤片过程中的较高温度能有效杀灭结核分支杆菌,所以能有效提高实验室生物安全水平。

 


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